丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)属于黄病毒科,其基因组为单股正链RNA,由于其RNA复制酶缺乏校正活性而呈高度异质性。目前HCV至少存在11种主要基因型和70余个亚型,按照国际通行的方法,以阿拉伯数字表示HCV基因型,以小写的英文字母表示基因亚型(如1a、2b、3c等)。基因1型呈全球性分布,占所有HCV感染的70%以上。在我国主要基因型为1b型,并且不同城市基因型分布也不同,天津地区1b型占绝大多数(80%以上)。
一、HCV基因分型检测的临床意义
大量临床试验表明,HCV lb及1a基因型比HCV 2型或3型对干扰素治疗的干扰素持续病毒学应答(the sustained viral response,SVR)更差,属于“难治性丙型肝炎”。
干扰素加利巴韦林联合治疗慢性HCV患者的研究发现:HCV基因型与病毒感染后病情的严重程度有一定关系,非1型HCV患者有比较高的SVR,1型HCV患者治疗48周才达到非1型HCV患者治疗24周的效果。1b型感染后肝脏的病理损害较其它型严重,也较多导致肝硬化、肝细胞癌,肝移植后也易导致移植失败。同时,1b型对干扰素治疗效果最差。可以肯定的是,不同基因型具有不同的生物学特性,并与病毒感染后的慢性化进程、病情的严重程度及抗病毒治疗的低反应性相关。因此,检测HCV基因型将为临床医师制定个体化抗病毒治疗方案提供指导。
二、HCV基因分型检测适用人群
根据国家卫生计生委发布《丙型病毒性肝炎筛查及管理》标准,丙型肝炎筛查结果为抗-HCV阳性、HCV RNA定量检测阳性,确诊感染丙型肝炎的患者,确定其利用干扰素进行抗病毒治疗起点。
三、我院开展HCV基因分型检测情况:
1.我院HCV基因分型检测技术
目前,我院通过低密度微阵列基因芯片检测技术,一次性快速、准确、有效地区分常见的11个主要基因型及其15个亚型。同时,为了确定基因芯片杂交结果的准确性,随机抽取部分患者的PCR产物直接测序,基因芯片的判读结果与测序结果一致,进一步证实了检测结果的准确,可靠性。所以,HCV基因分型检测对判断患者病情、选择优化的治疗方案、合理用药和降低患者治疗费用等具有重要意义。
2.我院开展HCV基因分型检测进展
我院采用低密度微阵列基因芯片检测技术,应用PCR扩增仪、低密度微阵列基因芯片杂交仪、电泳仪、凝胶成像系统等设备,一次性快速、准确、有效的区分常见的11个主要基因型及其15个亚型,是诊断、监测HCV基因分型最常用的方法。同时,我们随机抽取部分患者的PCR产物用测序的方法进行验证,充分证实了检测结果的准确,可靠性。
HCV基因分型检测的检测人员均通过临床检验中心的临床基因扩增实验室技术培训,并取得合格证书。自2003年开展HCV基因分型检测项目以来,检测数量逐年增加,而且由于设备及试剂盒的更新,检测的敏感性及准确性也大大提高,截止2014年的检测量已达到3000多例。
十几年来,我们通过低密度微阵列基因芯片检测技术对三千多例患者的HCV基因型进行检测,及时有效的为临床医师提供患者的准确监测数据,从而观察其病情进程和用药情况,具有显著的社会效益。
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