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乙肝病毒耐药基因检测
2015-10-08 09:56:48  来自:

  目前使用核苷类似物治疗乙肝已经成为临床治疗乙肝的主流,其优点是口服方便,迅速抑制HBV复制,防止或延缓慢性乙肝进展为肝硬化或肝癌。

  一、乙肝病毒耐药基因检测的临床意义

  由于患者长期服药,乙肝病毒的每一个基因区(包括S、P、C、X等全部4个基因)均可发生突变,使抗病毒治疗耐受、免疫耐受和免疫逃避等,进一步造成临床肝病的慢性化和复杂化,加重患者的病情和治疗困难。因此,乙肝病毒耐药基因检测对判断患者病情、选择治疗方案、合理用药和降低患者治疗费用等具有重要临床意义。

  二、乙肝病毒耐药基因检测适用人群

  根据国家卫生计生委发布《乙型病毒性肝炎筛查及管理》标准,乙型肝炎筛查结果为抗-HBV阳性、HBV DNA定量检测阳性,确诊感染乙型肝炎的患者,服用拉米夫定、替比夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦等抗病毒药治疗5个月,服药前后的动态检测,为临床追踪评价抗病毒治疗效果。

  三、本院开展乙肝病毒耐药基因检测情况

  1.本院乙肝病毒耐药基因检测技术

  我们主要针对拉米夫定、恩替卡韦、阿德福韦酯和替比夫定等药物的所有变异位点(如:与拉米夫定、替比夫定相关的rtM204I/V/S、rtL180M、rtV173L;与阿德福韦酯相关的rtA181T/V、rtN236T、rtV214A或rtQ215S;与恩替卡韦耐药相关的rtI169T、rtT184A/G/I/S、rtS202G/I或rtM250V等变异位点),采用国内外先进的检测技术同时进行检测:一、实时荧光定量PCR基因扩增技术,通过实时荧光定量PCR反应后各探针的CT值结果,判断是否发生已知204位点的V/I位点的变异。该技术应用广泛,也可以同时检测多个基因位点;检测结果快速准确;二、低密度微阵列基因芯片检测技术,,一次性的快速检测各个耐药突变位点。同时,为了确定检测结果的准确性,我们随机抽取部分患者的PCR产物直接测序,实时荧光定量PCR联合基因芯片的判读结果与测序结果一致,进一步证实了检测结果的准确,可靠性。对判断患者病情、选择好的治疗方案、合理用药和降低患者治疗费用等具有重要意义。

  2.本院开展乙肝病毒耐药基因进展:

  本院采用国内新的实时荧光定量PCR检测方法、应用美国ABI公司的ViiA7实时荧光定量PCR仪进行检测,该方法应用广泛,可以同时检测多个基因位点;检测结果快速准确。同时,采用低密度微阵列基因芯片检测技术,应用PCR扩增仪、低密度微阵列基因芯片杂交仪、电泳仪、凝胶成像系统等国内先进的设备,一次性的快速检测各个耐药突变位点,是诊断、监测乙肝病毒耐药基因常用的方法。同时,我们随机抽取部分患者的PCR产物用测序的方法进行验证,充分证实了检测结果的准确,可靠性。

  乙肝病毒耐药基因检测的检测人员均通过临床检验中心的临床基因扩增实验室技术培训,并取得合格证书;自2003年开展乙肝病毒耐药基因检测项目以来,检测数量逐年增加,而且由于设备及试剂盒的更新,检测的敏感性及准确性也大大提高,截止2014年的检测量已达到4000多例。

  乙肝病毒耐药基因检测为拉米夫定、替比夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦治疗12个月的患者进行服药前后的动态检测,为临床追踪评价抗病毒治疗效果的提供了较好的方法,结果更准确、相对更早地确定患者体内是否存在变异株,是临床追踪评价抗病毒治疗效果的好方法。为临床医师及时提供患者的准确的监测数据,从而观察患者的病情进程和用药情况,具有显著的社会效益。

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