我院肝胆疾病研究所高英堂研究团队在T细胞冻存上取得重要进展。课题组发现经过8和12天培养的T细胞冻存细复苏后再次培养即能恢复到与新鲜培养时的相同状态。有关研究成果于2017年9月发表在英文SCI杂志《冻存》(cryobiology)上,对过继性免疫治疗肿瘤具有重要参考价值。
肝细胞癌是全球第三大常见肿瘤,发病率和死亡率正逐年上升。虽然手术、放疗和化疗是控制肿瘤的三大常规有效方法,但也不能完全消除肿瘤细胞或肿瘤干细胞。过继性免疫疗法是从患者体内分离T细胞再通过体外诱导培养及扩增,最终回输到患者体内的一种治疗方式。目前临床上开展的过继性免疫细胞治疗多采自患者自体,且与手术、放、化疗等联合应用,所以选择恰当的应用时机,也就显得尤为重要。随着低温贮藏技术不断发展,利用低温冷冻技术保存细胞,在患者在需要的时候(如放疗、化疗后)提供足够数量的细胞也就成为可能。但有研究发现,低温保存导致细胞凋亡,并且与新鲜分离的细胞相比,冻存T细胞抗原识别功能会下降。所以寻求一种恰当的冻存复苏方法,以便在适宜的时机给予患者T细胞回输,从而提高细胞治疗疗效,仍是一个值得研究的问题。该研究团队对分离肝细胞癌患者外周血单个核细胞,按照培养不同阶段0,4,8,12天冻存细胞,保存2个月后复苏,检测细胞活性。结果发现,4天,8天和12天复苏后24小时细胞进入增殖状态,而0天组则需72小时。与新鲜培养成熟T细胞相比,冻存不会影响8天和12天组冻存后再次培养成熟细胞中CD8+细胞、NKT细胞和Treg细胞的比例,而对0天组细胞再次培养后其CD8+、NKT细胞及Treg细胞比例产生影响,对4天组的NKT细胞和Treg细胞比例有影响。ELISPOT结果显示冻存不会影响再次培养成熟的T细胞分泌IFN-γ的能力,而冻存后再次培养细胞中,8天和12天组T细胞分泌的IL-10能力下降。
原文引自:Luo Y, Wang P, Liu H, Zhu Z, Li C, Gao Y.The state of T cells before cryopreservation: Effects on post-thaw proliferation and function.Cryobiology. 2017 Dec;79:65-70.
(骆莹)
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